校準紫外分光光度計的波長是確保其測量準確性的重要步驟。以下是對波長校準的詳細步驟:
一、準備階段
1、選擇合適的標準物質:常用的標準物質有鈥玻璃和氧化釹濾光片等。這些標準物質具有已知的吸收峰,可用于波長校準。
2、檢查儀器狀態:確保光度計處于良好的工作狀態,包括光源燈的使用壽命、光學元件的清潔度以及儀器的穩定性等。
3、預熱儀器:打開電源開關,預熱儀器至少20分鐘,使儀器達到穩定的工作狀態。
二、校準步驟
1、設置儀器參數:將光度計設置為待測狀態,選擇合適的光源(如鎢燈或氘燈),并設置適當的掃描速度和狹縫寬度。
2、測量標準物質:將選擇的標準物質(如鈥玻璃)放入樣品室,關閉樣品室蓋。使用數字鍵輸入所需的波長范圍(如190-1100nm),并開始測量標準物質的吸收光譜。
3、調整波長:觀察測量得到的吸收光譜,與標準物質的已知吸收峰進行比較。如果測量值與標準值存在偏差,需要調整儀器的波長設置,直到測量值與標準值一致。
4、記錄數據:記錄校準后的波長值和相應的吸光度值,以便后續參考和使用。
三、注意事項
1、避免污染:在測量過程中,應避免標準物質受到污染或損壞,以免影響校準結果的準確性。
2、定期校準:建議定期對紫外分光光度計進行波長校準,以確保其測量準確性。校準頻率可根據儀器的使用情況和維護要求來確定。
3、專業操作:波長校準是一項專業性較強的工作,應由經過培訓的專業人員來執行。非專業人員在進行校準時可能會遇到困難或導致校準失敗。
通過選擇合適的標準物質、檢查儀器狀態、預熱儀器、測量標準物質、調整波長和記錄數據等步驟,可以對紫外分光光度計進行準確的波長校準。同時,需要注意避免污染、定期校準和專業操作等事項,以確保校準結果的準確性和可靠性。